更新時間:2018-05-08
NE,大鼠去甲腎上腺素ELISA試劑盒原理用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中大鼠去甲腎上腺素(NE)的含量。
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產品名稱:NE,大鼠去甲腎上腺素ELISA試劑盒原理
合作單位:高校/醫院/科研院;
實驗類型:夾心法/間接法/競爭法;
檢測范圍:0.25 ng/mL – 8 ng/mL。
反應時間: 1-5h
所需樣本體積: 50-100ul
檢測波長: 450 nm
靈敏度:zui低檢測濃度小于0.1 ng/mL。
特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
重復性:板內變異系數小于10% ,板間變異系數小于15% 。
應用范圍:用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本;
保存條件:2-8℃;
鄭重聲明:本產品僅供科研實驗,不適用于臨床診斷!
更多產品:
微量蛋白檢測系列:白介素類試劑盒,TNF類試劑盒,VEGF類試劑盒,腎損傷類試劑盒;
相關小分子檢測系列:皮質醇類試劑盒,HCY類試劑盒,T3,T4類試劑盒;
食品安全小分子檢測系列:慶大霉素ELISA檢測試劑盒,三聚氰胺ELISA檢測試劑盒,四環素ELISA檢測試劑盒,ELISA檢測試劑盒;
抗體檢測系列:鏈球菌溶血素o抗體ELISA檢測試劑盒,AQP-Ab類試劑盒,HINI試劑盒;
特種蛋白檢測:近十個種屬的白蛋白,球蛋白ELISA檢測試劑盒。
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樣本處理及要求
1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細胞培養物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響zui后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。